PCR檢測試劑盒有效期一般為1年，這是指在適當(dāng)?shù)膬?chǔ)存溫度下。核酸擴(kuò)增部分的試劑一般要貯存于-20℃下，產(chǎn)物檢測部分試劑則貯存于2-8℃。盡量避免反復(fù)凍融。重慶

產(chǎn)品名稱：普雷沃菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒

英文名稱：Prevotella spp.

產(chǎn)品貨號(hào)：LZ-P3943

分類：PCR檢測試劑盒

儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。

運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。

【結(jié)果分析條件設(shè)定】

普雷沃菌屬通用PCRu 基線（Baseline）設(shè)定：應(yīng)選擇該次實(shí)驗(yàn)指數(shù)擴(kuò)增前所有樣本熒光信號(hào)比較穩(wěn)定的一段區(qū)域（所有樣本熒光信號(hào)無較大波動(dòng)），起始點(diǎn)（Start）應(yīng)避開熒光采集起始階段的信號(hào)波動(dòng)，終止點(diǎn)（End）應(yīng)比早出現(xiàn)指數(shù)擴(kuò)增的樣本Ct值減少1~3個(gè)循環(huán)，建議基線設(shè)為6~15。

u 閾值(Threshold)設(shè)定：將閾值線設(shè)定在剛好超過正常陰性質(zhì)控品擴(kuò)增曲線的高點(diǎn)。

【質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)】

1.  陰性質(zhì)控品的檢測結(jié)果應(yīng)為陰性，無指數(shù)擴(kuò)增期，Ct=40或無Ct；

2.   陽性質(zhì)控品的檢測結(jié)果應(yīng)為陽性，有明顯的指數(shù)擴(kuò)增期，Ct值應(yīng)小于等于35；

3.   以上要求需在一次實(shí)驗(yàn)中同時(shí)滿足，否則該次實(shí)驗(yàn)視為無效。

【結(jié)果判斷】

1.  陽性：有明顯的指數(shù)擴(kuò)增期，且Ct＜38；

2.可疑：有明顯的指數(shù)擴(kuò)增期，且38≤Ct<40，此時(shí)樣本為可疑樣本；對(duì)于可疑樣本建議復(fù)核一次，若復(fù)核結(jié)果Ct<40且有指數(shù)擴(kuò)增期，則判定為陽性，否則判定為陰性；

3.   陰性：無指數(shù)擴(kuò)增期，Ct=40或無Ct值均判定為陰性樣本。

PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：

　　?、僖锱c模板DNA特異正確的結(jié)合；

　　?、趬A基配對(duì)原則；

　　?、跿aq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；

　　?、馨谢虻奶禺愋耘c保守性。

普雷沃菌屬通用試劑其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。

(2)靈敏度高

PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。

(3) 簡便、快速

PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。

(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低

不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板?？芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。

PCR檢測步驟:

1樣品處理

1）按照GB 4789.10-2016（或SN/T 1870-2016），取樣品25g（mL），加入到含有225mL 7.5% NaCl肉湯的無菌容器中均質(zhì)，調(diào)節(jié)pH至6.8±0.2。

2）36±1℃培養(yǎng)18-24h。

注：也可參考其他地方標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行樣品的前處理。

2、核酸提取

1）取40μL增菌液于裂解液管中，98℃或沸水浴10min。

2）冷卻至室溫，吸取上清備用或者置于-20℃保存。

3、反應(yīng)體系配置

從試劑盒中取出SA預(yù)混液，充分融化，短暫離心，然后將陰性對(duì)照、樣品的DNA提取液、陽性對(duì)照各取5μL分別加入PCR管中，蓋好管蓋，短暫離心，立即進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng)。

4、PCR擴(kuò)增

PCR管置于PCR儀上，推薦反應(yīng)程序設(shè)定如下：反應(yīng)體系為25μL，在第二步每個(gè)循環(huán)60℃時(shí)檢測熒光信號(hào)，檢測通道選擇FAM。

公司正在出售的產(chǎn)品：

真菌/酵母細(xì)胞活性線粒體分離試劑盒

二甲酚橙（XYLENOL ORANGE）比色法定量檢測試劑盒

石蠟切片組織AKT蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒

冰凍切片組織IKB-ALPHA蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒

組蛋白H4-K8乙?；瘷z測試劑盒

組織游離脂肪酸酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒

血液過氧化氫（HYDROGEN PEROXIDE）活性比色法定量檢測試劑盒

體液基質(zhì)金屬（MMP-12）活性熒光定量檢測試劑盒

細(xì)胞酸二酯酶3（PDE3）活性熒光定量檢測試劑盒

體液糖類總量鐵化物比色法定量檢測試劑盒

M13DNA純化試劑盒

肉類總?cè)樗岜壬ǘ繖z測試劑盒

凋亡相關(guān)蛋白3抗體

原癌基因AF4蛋白抗體

1號(hào)染色體開放閱讀框148抗體

鈣/鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激酶4抗體

細(xì)胞外基質(zhì)金屬蛋白酶誘導(dǎo)因子抗體

7號(hào)染色體開放閱讀框26抗體

0酸化酪酸蛋白激酶受體B1抗體

細(xì)胞生長抑制蛋白26/前列腺特異性膜抗原樣蛋白抗體

間隙連結(jié)蛋白31.9抗體

γ-谷酰轉(zhuǎn)肽酶5輕鏈抗體

普雷沃菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒SEC63域內(nèi)含蛋白1抗體

• 

  輔酶ⅠNAD(H)含量試劑盒可見分光光度法

  325元

  產(chǎn)品名：輔酶ⅠNAD,(H)含量試劑盒,可見分光光度法

• 

  輔酶ⅠNAD(H)含量試劑盒微量法

  598元

  產(chǎn)品名：輔酶ⅠNAD,(H)含量試劑盒,微量法

• 

  陰溝腸桿菌分離瓊脂(ECIA)

  3200元

  產(chǎn)品名：陰溝腸桿菌分離瓊脂,培養(yǎng)基

• 

  乙酰胺肉湯生化管

  3200元

  產(chǎn)品名：乙酰胺肉湯生化管,培養(yǎng)基

• 

  乙酰胺肉湯

  3200元

  產(chǎn)品名：乙酰胺肉湯,培養(yǎng)基

• 

  胰酪胨大豆多粘菌素肉湯

  3200元

  產(chǎn)品名：胰酪胨大豆多粘菌素,培養(yǎng)基

• 

  胰酶細(xì)胞消化液(不含EDTA)

  3200元

  產(chǎn)品名：胰酶細(xì)胞消化液,培養(yǎng)基

• 

  胰酪胨大豆羊血瓊脂基礎(chǔ)

  3200元

  產(chǎn)品名：胰酪胨大豆羊血,培養(yǎng)基