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反芻獸曼氏桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒

更新時間1:2025-10-05 信息編號:df224gave85553 舉報維權(quán)
反芻獸曼氏桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒
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反芻獸曼氏桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒
供應(yīng)商 上海聯(lián)祖生物科技有限公司 店鋪
認(rèn)證
報價 人民幣 4490.00元每盒
關(guān)鍵詞 熒光定量PCR試劑盒,反芻獸曼氏桿菌PCR,反芻獸曼氏桿菌試劑
所在地 上海市嘉定區(qū)嘉羅公路1661
何君
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2年

產(chǎn)品詳細(xì)介紹

PCR檢測試劑盒產(chǎn)品簡介

產(chǎn)品名稱:反芻獸曼氏桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒

英文名稱:Mannheimia ruminalis

產(chǎn)品貨號:LZ-P3749

分類:PCR檢測試劑盒

儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。

運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。

PCR檢測試劑盒有效期一般為1年,這是指在適當(dāng)?shù)膬Υ鏈囟认隆:怂釘U(kuò)增部分的試劑一般要貯存于-20℃下,產(chǎn)物檢測部分試劑則貯存于2-8℃。盡量避免反復(fù)凍融。上海

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【結(jié)果分析條件設(shè)定】

u 基線(Baseline)設(shè)定:應(yīng)選擇該次實驗指數(shù)擴(kuò)增前所有樣本熒光信號比較穩(wěn)定的一段區(qū)域(所有樣本熒光信號無較大波動),起始點(diǎn)(Start)應(yīng)避開熒光采集起始階段的信號波動,終止點(diǎn)(End)應(yīng)比早出現(xiàn)指數(shù)擴(kuò)增的樣本Ct值減少1~3個循環(huán),建議基線設(shè)為6~15。

u 閾值(Threshold)設(shè)定:將閾值線設(shè)定在剛好超過正常陰性質(zhì)控品擴(kuò)增曲線的高點(diǎn)。

【質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)】

1.  陰性質(zhì)控品的檢測結(jié)果應(yīng)為陰性,無指數(shù)擴(kuò)增期,Ct=40或無Ct;

2.   陽性質(zhì)控品的檢測結(jié)果應(yīng)為陽性,有明顯的指數(shù)擴(kuò)增期,Ct值應(yīng)小于等于35;

3.   以上要求需在一次實驗中同時滿足,否則該次實驗視為無效。

【結(jié)果判斷】

1.反芻獸曼氏桿菌PCR陽性:有明顯的指數(shù)擴(kuò)增期,且Ct<38;

2.可疑:有明顯的指數(shù)擴(kuò)增期,且38≤Ct<40,此時樣本為可疑樣本;對于可疑樣本建議復(fù)核一次,若復(fù)核結(jié)果Ct<40且有指數(shù)擴(kuò)增期,則判定為陽性,否則判定為陰性;

3.   陰性:無指數(shù)擴(kuò)增期,Ct=40或無Ct值均判定為陰性樣本。

PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:

  ?、僖锱c模板DNA特異正確的結(jié)合;

  ?、趬A基配對原則;

  ?、跿aq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;

  ?、馨谢虻奶禺愋耘c保守性。

其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。

(2) 反芻獸曼氏桿菌試劑靈敏度高

PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞中檢出一個靶細(xì)胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中小檢出率為3個細(xì)菌。

(3) 簡便、快速

PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。

(4)對標(biāo)本的純度要求低

不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。

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公司正在出售的產(chǎn)品:

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反芻獸曼氏桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒phospho-ZCWCC1 (Ser739): 0酸化ZCWCC1抗體 0.1ml

DSPP: 牙本質(zhì)0蛋白抗體 0.1ml

APP淀粉樣肽前體蛋白抗體 Anti-APP/Amyloid beta A4 0.1ml

Anti-AFP/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記鼠抗人甲胎蛋白單克隆抗體(檢測)IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-eNOS(Thr495) 0酸化合成酶3抗體(內(nèi)皮型) 規(guī)格 0.1ml

Nadrin peptide 發(fā)育調(diào)節(jié)蛋白多肽抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg


PCR檢測步驟:

1、樣品處理

1)按照GB 4789.10-2016(或SN/T 1870-2016),取樣品25g(mL),加入到含有225mL 7.5% NaCl肉湯的無菌容器中均質(zhì),調(diào)節(jié)pH至6.8±0.2。

2)36±1℃培養(yǎng)18-24h。

注:也可參考其他地方標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行樣品的前處理。

2、核酸提取

1)取40μL增菌液于裂解液管中,98℃或沸水浴10min。

2)冷卻至室溫,吸取上清備用或者置于-20℃保存。

3、反應(yīng)體系配置

從試劑盒中取出SA預(yù)混液,充分融化,短暫離心,然后將陰性對照、樣品的DNA提取液、陽性對照各取5μL分別加入PCR管中,蓋好管蓋,短暫離心,立即進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng)。

4、PCR擴(kuò)增

PCR管置于PCR儀上,推薦反應(yīng)程序設(shè)定如下:反應(yīng)體系為25μL,在第二步每個循環(huán)60℃時檢測熒光信號,檢測通道選擇FAM。


所屬分類:化學(xué)助劑/試劑盒

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